19 de ago. de 2012

Quantiferon TB Gold

O teste tuberculínico intradérmico ou PPD começou a ser utilizado em 1890, pelo próprio Roberto Koch, ao estudar o efeito protetor da aplicação de bacilos de M. tuberculosis inativados em pessoas sadias. Por mais de um século, o PPD permaneceu como o único teste disponível para a identificação de casos de infecção latente pelo M. tuberculosis (LTBI). Entretanto, a falta de especificidade, principalmente pela reatividade cruzada com Mycobacterium bovis Calmette-Guérin, utilizado como antígeno da vacina BCG, e também com outras espécies de Mycobaterium diferentes do M. tuberculosis (NMT) podem levar a resultados a uma grande quantidade de resultados falso-positivos, com a consequente implementação de tratamentos desnecessários. Em um estudo conduzido com soldados e funcionários do exército holandês, foi obtido um índice de 75% de resultados falso-positivos com o PPD, que foi atribuído à infecção por outras espécies de micobactérias.
Aplicação de Tuberculina (Teste de PPD)
Um teste aprovado pelo FDA americano em 2007 e recentemente comercializado no Brasil, chamado de Quantiferon TB Gold, mede a quantidade de Inteferon Gama (IFN-γ), uma citosina produzida pelas células T efetoras, em resposta à presença de antígenos do complexo Mycobacterium tuberculosis, como o ESAT-6 (Early Secretory Antingen), CFP-10 complexo protéico 10 obtido por filtração de culturas e TB7.7, compreendidos nas regiões genômicas de diferenciação 1 e 11 (RD1 e RD11). As regiões RD1 e RD11 estão ausentes nas preparações do bacilo BCG e também na maioria das micobactérias não-tuberculosas (NTM).

Estes antígenos se encontram aderidos nos tubos que são utilizados para a coleta do sangue. Quando os linfócitos de indivíduos previamente expostos ao M. tuberculosis entram em contato com os antígenos, ocorre a liberação de IFN-γ. São utilizados 3 tipos de tubos para a coleta de sangue: um contendo os antígenos específicos, um segundo tubo contendo antígenos estimuladores de células T não específicos, que funciona como controle positivo, e um terceiro tubo sem nenhum tipo de antígeno, que funciona como controle negativo.

Após um período de incubação a 37°C, é feita a quantificação de IFN-γ através de técnica de Enzimaimunoensaio (EIA). Também conhecido com teste de IGRA (Interferon Gama Release Assay), o Quantiferon TB Gold apresenta como vantagens em relação ao PPD a não interferência com os antígenos utilizados na BCG, ser um teste in vitro, que elimina as variáveis biológicas interindividuais, e ser um teste que mede diretamente a reação imunológica mediada por células. Vários estudos demonstram que o teste TB Gold, quando comparado com o teste de PPD, apresenta maior grau de sensibilidade e de especificidade. Como desvantagem, o teste IGRA, assim como o PPD, não é capaz de distinguir entre Tuberculose ativa e Tuberculose latente.
A utilização do teste Quantiferon Tb Gold isoladamente ou em conjunto com o PPD é capaz de reduzir os custos com exames e tratamentos para tuberculose em cerca de 50%.

Em um estudo realizado na China, aonde a tuberculose atinge 367 casos a cada 100 mil habitantes (cerca de 10 vezes mais do que no Brasil), sendo o segundo país em incidência de tuberculose em todo o mundo, a utilização do teste IGRA apresentou sensibilidade de 83,6% e especificidade de 76,6%. Em um estudo conduzido por pesquisadores espanhóis, comparando testes IGRA com o PPD em uma população pediátrica, foram obtidos resultados que apontam cerca de 50% dos resultados de PPD com falsa reatividade, devido à reatividade cruzada com BCG e NTM6. Em estudo conduzido por pesquisadores brasileiros na cidade de São Paulo, avaliando a utilização do teste TB Gold para o diagnóstico de Tuberculose Pulmonar, apesar da pequena quantidade de indivíduos analisados, foram registrados índices de sensibilidade e de especificidade de 86% e 100%, respectivamente.
Quando comparado especificamente com a pesquisa direta para BAAR, o teste TB Gold apresentou sensibilidade 45% superior à pesquisa de BAAR (amostras TB Gold positivas, BAAR negativas e Cultura positivas). Em um recente estudo realizado na Holanda, os pesquisadores assinalaram a presença de resultados falso-positivos de PPD, mesmo com induração maior que 15mm, atribuídos ao contato com NMT, que tiveram o resultado de Tb Gold (IGRA) negativo, sugerindo que apenas aqueles indivíduos com ambos os testes tuberculínicos (PPD) e IGRA (Tb Gold) devam ser tratados com isoniazida. Com base nos estudos publicados, o Center for Diseases Control and Prevention (CDC) americano passou a recomendar que os testes IGRA passassem a ser realizados em substituição ao teste tuberculínico (PPD). O CDC recomenda ainda que o teste não seja utilizado em algumas populações específicas por ainda não existirem dados suficientes para uma conclusão, como em crianças menores de 5 anos, pessoas expostas recentemente ao M. tuberculosis, indivíduos imunocomprometidos e também não é recomendada a realização seriada do teste.

Por mais de um século, o diagnóstico laboratorial da tuberculose tem desafiado os patologistas clínicos, principalmente pelas dificuldades relacionadas ao caráter fastidioso do seu agente etiológico, o Mycobacterium tuberculosis; entretanto, nos últimos anos, uma nova safra de testes vem modificando o cenário desse tipo de diagnóstico. Além dos testes baseados na resposta imunológica in vitro como os testes de IGRA – Quantiferon Tb Gold, grandes avanços têm sido obtidos através dos testes baseados em biologia molecular. Um bom exemplo é o GeneXpert MTB, que é capaz de fornecer resultados de pesquisa de DNA do M. tuberculosis e da presença de mutações que conferem multirresistência em cerca de 1 hora. Além desse, outros testes, também baseados em análises moleculares, são capazes de identificar a espécie de Mycobacterium e também de fornecer o perfil completo de suscetibilidade a drogas a partir da análise de mutações genéticas que conferem resistência em algumas horas, quando são necessários cerca de 60 dias para a obtenção de um resultado completo com perfil de suscetibilidade pelos métodos microbiológicos tradicionais.


Fonte:

 

14 de ago. de 2012

Dia do Cardiologista


14 de Agosto
Dia do Cardiologista





Parabéns, para você médico especialista em cardiologia ou estudante que visa se especializar nessa área de grande importância



3 de ago. de 2012

Janela Imunológica - HIV

A janela imunológica é um conceito originado de estudos realizados em bancos de sangue no intuito de definir o risco de transmissão do HIV. É o período em que um vírus em quantidade suficiente para ocorrer transmissão por transfusão sanguínea.

A janela imunológica em um conceito ampliado compreende o período de tempo entre a exposição do indivíduo ao vírus e o surgimento de marcadores laboratoriais detectáveis no organismo (antígeno ou anticorpo).

Tendo em vista que o sistema imunológico de cada indivíduo responde de forma diferente á infecção pelo HIV e que o desenvolvimento de anticorpos anti-HIV ou da replicação viral em quantidade suficiente para ser detectada pelos métodos diagnósticos vigentes é dependente da resposta individual, este tempo de janela imunológica varia de pessoa para pessoa.